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有關干粉培養基煮沸滅菌的方式及步驟都在這里

點擊次數:120 發布時間:2021-08-27
  干粉培養基在使用之前必須進行滅菌處理,將其所含活菌全部殺死或全部除去。常用的滅菌方法有過濾除菌、干熱滅菌、濕熱滅菌及輻照滅菌等。
 
  其中,濕熱滅菌法又包括四種方式:煮沸法、流動蒸汽滅菌法、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法。通常來說,使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法。
 
  但是對于有些培養基來說,高壓條件會損壞培養基中的某些成分,不利于培養基的使用,所以只能采用煮沸滅菌的處理方法。本文主要就煮沸滅菌方法進行討論。
 
  有關煮沸滅菌的描述,通常有如下幾種方式:
 
  a、稱取本品41. 5g,加熱溶解于1000mL蒸餾水中,煮沸不要超過2分鐘。無需高壓滅菌。臨用時制備,不得超過3小時。
 
  b、稱取本品50. 3g,加入1000mL蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,冷至45-50℃, 搖勻,傾入無菌平皿備用。無需高壓滅菌。
 
  c、稱取本品89g,煮沸溶解于1000mL蒸餾水中,冷至45-50℃時,傾入無菌平皿,備用。注:無需高壓滅菌。
 
  d、稱取本品57g,加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中,不要過分加熱,冷至50-55℃時,傾入無菌平皿,部分開蓋干燥2h,然后蓋上,備用。無需高壓滅菌。在24小時內使用。
 
  這些方法描述中,都特別強調“無需高壓滅菌”、“不要過分熱”、“煮沸充分溶解”,那么究竟該怎樣操作,才能達到既滅菌完全又盡量降低對培養基的破壞呢?
 
  煮沸滅菌的實際操作
 
  1、關于煮沸方式,有人提出可以隔水煮沸,但經過反復試驗,發現這種煮沸方式存在兩大弊端:①溫度不夠,達不到滅菌效果;②經隔水煮沸的含瓊脂培養基,在水浴的過程中易出現分層現象。
 
  2、為了對培養基進行有效煮沸滅菌,根據我們實踐摸索,建議如下操作:
 
 ?、贉蕚浜秒姶艩t和搪瓷缸(不要用鐵質容器) ;
 
 ?、趯⑴囵B基按比例加水,稱量至搪瓷缸中,用玻璃棒不斷攪拌,直至完全溶解、無明顯團狀物或顆粒;
 
 ?、蹖⑻麓筛字糜陔姶艩t上,大火燒開,期間持續攪拌,避免糊底;當液面完全沸騰后,立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開,算是一次煮沸操作;液面回落后,立即放回電磁爐,重復上面的步驟;總共煮沸3次即可。
 
 ?、軐⒅蠛玫呐囵B基冷卻至需要的溫度,進行傾注平皿等操作。

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